Kelulut merupakan kelompok lebah dari Famili Apidae dan Subfamili Meliponinae dengan jumlah spesies yang teridentifikasi sebanyak 500 jenis(Winston & Michener, 1977). Berdasarkan laporan(Kahono et al., 2018), Indonesia memiliki 46 jenis kelulut yang tersebar di berbagai daerah di Indonesia mulai dari Sumatra, Jawa, Kalimantan, Sulawesi, dan wilayah timur Indonesia, seperti Kepulauan Maluku dan Papua. Keanekaragaman jenis kelulut yang cukup tinggi di Indonesia mendukung dalam pengembangan sektor agribisnis berupa budi daya kelulut.

Budi daya kelulut merupakan salah satu prospek bisnis yang sudah banyak dikembangkan di berbagai daerah di Indonesia. Secara biologis, kelulut bersifat adaptif, dapat bersarang di beragam tempat, serta beberapa jenis lebih mudah untuk dibudidayakan. Tetragonula laeviceps (Smith) merupakan salah satu spesies kelulut yang tersebar luas budidayanya di Indonesia. Di Kalimantan sendiri, spesies kelulut yang paling banyak dibudidayakan selain T. laeviceps adalah Tetragonula fuscobalteata (Cameron), Tetrigona apicalis (Smith), T. binghami Distant, Heterotrigona itama (Cockerell), Homotrigona fimbriata (Smith), Geniotrigona thoracica Smith, dan Lepidotrigona terminata Smith (Buchori et al., 2022). Madu kelulut memiliki kandungan senyawa terpenoid alami yang terbukti memiliki sifat antimikroba sehingga berpotensi sebagai sumber pengobatan alternatif (Torres et al., 2018).

Budi daya kelulut menjadi peluang ekonomi yang cukup besar potensinya, khususnya bagi masyarakat sekitar kawasan hutan (Bradbear, 2009). Masyarakat Desa Belaban, Kecamatan Menukung Kabupaten Melawi merupakan komunitas yang tinggal di dekat kawasan konservasi Resort Belaban Taman Nasional Bukit Baka Bukit Raya. Resort tersebut merupakan kawasan hutan hujan tropis pegunungan yang termasuk ke dalam SPTN (Seksi Pengelolaan Taman Nasional) I Nanga Pinoh dan menjadi habitat satwa liar (MacKinnon et al., 2010);(Auliyani, 2017) termasuk 7 jenis kelulut, yaitu Heterotrigona erythrogastra (Cameron), H. itama, Lepidotrigona latipes (Friese), T. fuscobalteata, T. melanocephala (Gribodo), Tetragonula melina (Gribodo), dan Tetrigona sp. (Rivaldy, 2021).

Kelulut diidentifikasi melalui pengamatan karakter morfologi tubuh dan morfometrik (Sakagami et al., 1990);(Azizi et al., 2020); (Anaktototy et al., 2021) maupun dengan pengamatan karakter venasi sayap (Laksono et al., 2020). Akan tetapi, kelemahan pada model identifikasi ini harus dilakukan secara langsung di bawah mikroskop karena karakter kunci, seperti tibia belakang, basitarsus belakang, jarak malar, mandibula, kepala, clypeus, propodeum, mesoscutellum, antena, mata, venasi sayap, dan hamuli (Smith, 2012) terbilang sangat kecil untuk diamati secara langsung. Kondisi ini menyulitkan bagi para pembudidaya lokal yang tidak memiliki akses terhadap peralatan maupun pengetahuan dasar dari identifikasi menggunakan karakter morfologi.

Pendekatan lain terkait identifikasi kelulut, yaitu melalui pengamatan karakter pintu masuk sarang ((Michener, 1974); Roubik 1983). Pintu masuk sarang merupakan bagian dari kenampakan morfologi yang menjadi ciri arsitektural tempat tinggal suatu koloni kelulut. (Wille & Michener, 1973) menjelaskan bahwa karakter fenotipe, seperti struktur bagian luar sarang menjadi kajian sistematika yang dapat dipelajari lebih mendalam. Kelebihan dari pendekatan ini adalah tidak dibutuhkan peralatan khusus dan tanpa harus membongkar sarang untuk mendapatkan sampel. Namun, penelitian mengenai karakter pintu masuk sarang kelulut lokal Indonesia masih sangat minim ditemukan. Pengetahuan sederhana ini dapat digunakan sebagai dasar dari proses budi daya dan konservasi terutama terkait dengan kelulut liar maupun yang dibudidayakan. Lebih lanjut lagi, berdasarkan pengetahuan ini masyarakat dapat diberdayakan untuk memperoleh dan mengelola madu alami kelulut sebagai salah satu hasil hutan bukan kayu (HHBK) serta mengetahui keberadaan kelulut-kelulut langka, khususnya di sekitar kawasan Resort Belaban SPTN wilayah 1 Nanga Pinoh, Taman Nasional Bukit Baka Bukit Raya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakter penciri morfologi pintu masuk sarang spesies kelulut yang ditemukan di kawasan konservasi Resort Belaban, Taman Nasional Bukit Baka Bukit Raya.

Principal component analysis (PCA) dilakukan untuk menentukan karakter penciri morfologi pintu masuk sarang dari setiap spesies yang ditemukan. Analisis dilakukan menggunakan software PAST 4.03 dari data meristik dan morfometrik berdasarkan hasil pengukuran dan observasi. Khususnya data meristik, data yang diperoleh dikonversi menjadi nilai angka dengan ketentuan parameter yang dijelaskan dalamTabel 1, sedangkan data morfometrik menggunakan hasil rata-rata tinggi pintu masuk (TPM), luas bukaan rongga pintu masuk (LBR), dan panjang corong pintu masuk (PPM).

Penentuan karakter utama hasil PCA dilihat berdasarkan eigenvalue lebih dari satu dan persentase varian. Karakter utama yang menjadi penciri khas pintu masuk sarang kelulut diseleksi berdasarkan nilai loading score tiap karakter. Parameter loading score yang digunakan dari hasil interpretasi data PCA, yaitu sebesar 0,5 (very significant) mengikuti Lombarte et al. (2012).

Perhitungan luas bukaan rongga pintu masuk sarang (opening cavity) merujuk(Couvillon et al., 2008)Gambar 5. Bukaan pintu masuk sarang ber- bentuk lingkaran/melingkar, menggunakan rumus:

A: luas permukaan (mm²)

; D: diameter (mm);

Sementara, bukaan rongga pintu masuk berbentuk elips menggunakan rumus:

A: luas permukaan (mm²); : rasio keliling lingkaran dengan diameter (3,14); = X/2; sumbu horintal (mm); = Y/2; sumbu vertikal (mm).

Analisis PCA karakter morfometrik dan meristik dapat dilakukan setelah terdapat data dan parameter yang disesuaikan dari masing-masing karakter yang ditemukan di lapangan. Nilai loading score yang digunakan untuk melihat karakter utama dalam masing-masing PC menggunakan tiga parameter, yaitu >0,3 berarti low significant, >0,4 berarti more significant, dan >0,5 berarti very significant (Lombarte et al. 2012). Parameter yang digunakan dalam penentu karakter utama penelitian ini adalah >0,5 atau very significant.

Berdasarkan hasil PCA, karakter ukuran luas bukaan rongga pintu masuk (LBR) dalam PC 1 merupakan karakter yang berpengaruh terhadap morfologi dari pintu masuk sarang kelulut. Hal ini berhubungan dengan aktivitas keluar-masuk kelulut dan penjagaan terhadap gangguan faktor luar. Bentuk dan luas dari bukaan rongga pintu masuk dipengaruhi oleh faktor ukuran tubuh suatu spesies kelulut (Michener, 2007). Semakin besar bukaan rongga pintu masuk kelulut maka akan semakin mempermudah dalam aktivitas keluar- masuk kelulut pekerja dan aktivitas penjagaan serta jumlah kelulut penjaga yang membantu untuk melakukan pengamatan musuh di luar sarang (Couvillon et al., 2008).

Bukaan rongga pintu masuk yang ditemukan dalam penelitian hanya disebutkan dalam dua bentuk, yaitu lingkaran dan elips. Hal tersebut guna menjelaskan secara spesifik bentuk yang ditemukan dan rumus yang akan digunakan untuk menghitung luasnya. Meski demikian, selain elips dan lingkaran juga ditemukan bentuk bukaan rongga pintu masuk lain atau sebutan lain, seperti circular atau melingkar pada spesies Geotrigona subterranea (Friese) (Barbosa et al., 2013). Spesies Tetragonula sapiens (Cockerell) memiliki bentuk bukaan rongga pintu masuk ireguler, oval, elips, dan segitiga (Sayusti et al., 2020).

Ukuran panjang corong pintu masuk (PPM) sarang kelulut merupakan karakter yang dapat digunakan untuk menghindari serangan predator, seperti yang ditemukan pada spesies T. melina dan H. fimbriata. Semakin panjang corong pintu masuk sarang kelulut maka semakin banyak resin atau eksudat getah yang diperlukan untuk melapisi struktur corong (Michener, 2000). Menurut (Pujirahayu et al., 2020), arah corong yang panjang dan miring ke bawah membantu untuk menghindari tetesan air hujan masuk ke dalam sarang, sebab keberadaan sarang yang tidak terlindung oleh dedaunan yang padat. Corong pintu masuk sarang yang pendek, tetapi dilengkapi dengan fitur resin yang tebal dan lengket juga membantu dalam upaya perlindungan koloni kelulut terhadap predator yang mencoba masuk melalui pintu masuk sarang.

Perbedaan ketinggian dibangunnya sarang dengan pintu masuk sarang sebagai penanda membuktikan adanya preferensi posisi ketinggian yang disukai oleh spesies kelulut pada suatu rongga pohon, khususnya di kawasan konservasi Resort Belaban adalah pohon hidup. Studi terdahulu menunjukkan bahwa kebanyakan lebah sosial, seperti halnya kelulut membangun sarang pada rongga batang pohon hidup karena dapat menjadi sumber makanan utama (Maia-Silva et al., 2016); (Orr et al., 2022). Ancaman simbiosis parasitisme dari serangga lain juga menyebabkan suatu koloni lebah membangun sarang dengan ketinggian tertentu (Moure-Oliveira et al., 2019). Selain itu, dampak dari pemakaian pestisida menyebabkan penurunan efektifitas fungsi tanah ataupun inbreeeding koloni (Woodcock et al., 2017).

Bagi spesies T. apicalis yang sarangnya terletak paling tinggi, ataupun spesies lainnya yang letaknya lebih rendah, kedua karakter tersebut tetap akan saling berhubungan. Hal ini dikaitkan dengan perilaku harian dan perilaku internal koloni suatu spesies kelulut. Oleh karena preferensi ketinggian dibangunnya suatu sarang berbeda maka untuk menandakan keberadaan sarang koloni khususnya bagi kelulut pekerja adalah dengan keberadaan material penyusun pada pintu masuk (Breed et al., 1995). Semakin panjang suatu pintu masuk maka diperlukan material lebih banyak dan juga disesuaikan dengan material yang sering dipakai oleh koloni kelulut. Senyawa kimia dari material penyusun sarang, seperti wax atau getah dan resin dapat diketahui oleh kelulut karena sebagian dari senyawa tersebut juga menempel pada bagian kutikula dan kinerja dari sistem olfaktori kelulut(D’Ettorre et al., 2006).

Karakter variasi warna (VW) menjadi salah satu karakter utama pembeda pintu masuk sarang masing-masing spesies kelulut apabila dilihat berdasarkan garis biplot PCA. Pada spesies T. iridipennis, warna pintu masuk sarang yang ditemukan adalah hitam keabuan. Hal ini sejalan dengan penelitian (Chauhan & Singh, 2019) yang menemukan bahwa warna dari pintu masuk sarang T. iridipennis serupa dengan hasil pengamatan dalam penelitian ini. Warna dari masing-masing pintu masuk sarang yang ditemukan berbeda- beda karena eksudat getah ataupun resin dapat mengalami oksidasi, yang membuat warnanya dapat berubah menjadi lebih gelap dari warna sebelumnya. Beberapa jenis pohon juga menghasilkan warna getah ataupun resin yang berbeda (Syafrizal & R, 2014). Setiap warna getah dipengaruhi oleh produksi metabolit sekunder, seperti terpenoid dan dapat menjadi penanda karakter suatu pohon. Semakin banyak kandungan terpenoid yang dihasilkan maka semakin disukai oleh kelulut sebab berguna sebagai repellent serangga predator, serta sebagai antimikroba yang dapat digunakan untuk melindungi sarang koloni (Torres et al., 2018).

Kekhasan paling mencolok dari karakter- karakter pintu masuk dalam penelitian dapat ditemukan pada spesies H. fimbriata dan T. melanocephala. Selain karena kedua spesies tersebut memiliki dua bentuk rongga pintu masuk (lingkaran dan elips), kedua spesies tersebut juga memiliki kekhasan berupa perbedaan warna, margin dan ornamen, bentuk corong, dan karakter permukaan badan corong. Singkatnya, H. fimbriata dan T. melanocephala memiliki dua tipe atau disebut juga dua rupa pintu masuk sarang yang berbeda.

Tidak hanya H. fimbriata dan T. melanocephala yang dalam penelitian ini ditemukan memiliki dua bentuk rongga pintu masuk dan bentuk corong. Beberapa penelitian melaporkan bahwa kelulut memiliki berbagai variasi bentuk rongga pintu masuk dan bentuk corong. (Sayusti et al., 2020) melaporkan spesies dari genus Tetragonula, yaitu T. clypearis, T. fuscobalteata, dan T. sapiens, L. terminata, dan kelulut endemik Sulawesi Barat Wallacetrigona incisa (Sakagami & Inoue) memiliki bentuk rongga pintu masuk berbeda- beda, seperti bentuk segitiga, elips, tidak beraturan, dan pipih. Spesies yang juga diketahui memiliki bentuk rongga pintu masuk melingkar atau elips adalah G. subterranea (Barbosa et al., 2013), G. thoracica, Tetragonisca angustula (Latreille) (Roubik, 2020), Lepidotrigona ventralis (Smith) (Vijayakumar, 2014); (Chauhan & Singh, 2019).

Keragaman bentuk corong atau VBC berdasarkan hasil analisis PCA dalam penelitian ini menunjukkan bahwa karakter tersebut sesuai sebagai salah satu karakter utama pembeda pintu masuk sarang. Meski demikian, hasil ini dapat berbeda-beda karena bentuk corong juga dipengaruhi oleh keadaan lingkungan (Sayusti et al., 2020). Hal tersebut berhubungan dengan gangguan faktor lingkungan, baik predasi ataupun cuaca yang membuat kelulut perlu beradaptasi dalam menciptakan bentuk pintu masuk yang sesuai. (Vijayakumar, 2014) melaporkan bentuk corong dari L. ventralis adalah pipa mengerucut atau terompet, sama halnya seperti yang dimiliki oleh spesies T. melanocephala dalam penelitian ini. Dalam penelitian ini, bentuk corong pipa pendek dimiliki spesies T. melanocephala. Bentuk serupa dimiliki oleh spesies T. sapiens dan L. terminata dan berfungsi sebagai pencegah kehadiran serangga, seperti semut. Spesies T. sapiens dan L. terminata juga memiliki bentuk corong pipa memanjang, sama halnya dengan spesies H. fimbriata dan T. collina dalam penelitian. Bentuk tersebut berguna untuk mencegah hujan lebat memasuki internal sarang (Alves et al., 2018).

Karakter margin pintu masuk sarang pada masing-masing spesies memiliki keunikan tersendiri, tetapi bukan menjadi karakter utama penciri morfologi pintu masuk sarang kelulut. Namun, margin pada beberapa spesies tetap memiliki keunikan tersendiri yang membuatnya masih dapat dibedakan berdasarkan tujuh spesies yang ditemukan dari penelitian ini. Margin pada spesies T. melanocephala memiliki variasi warna yang beragam serta salah satunya berbentuk seperti matahari karena margin bukaan rongga pintu masuk membentuk corona. Karakter tersebut sama dengan yang dimiliki spesies Tetragonula testaceitarsis (Cameron) dan terlihat mencolok berwarna kuning kemerahan (Sanjaya et al., 2019). Margin pintu masuk sarang spesies P. pendleburyi merupakan yang terlembut dengan keunikan berupa pori-pori kecil. Bagian margin terlihat seperti ada robekan pori tidak rata, dan berwarna putih seperti jaring. Struktur ini berbeda dengan yang ditemukan pada spesies P. klossi Schwarz dengan struktur luar sarang yang berbentuk seperti koral, serta lebih keras (Banziger et al., 2011). Hal ini dapat menjadi petunjuk identifikasi dari karakter pintu masuk sarang genus Pariotrigona.

Permukaan badan corong pintu masuk merupakan salah satu karakter yang menonjol sebab dapat langsung dilihat dan dirasakan teksturnya. Tekstur dipengaruhi oleh lilin, getah, resin, material tambahan, seperti pasir halus atau kerikil, serta butiran-butiran propolis yang sengaja diletakkan di bagian dalam corong pintu masuk sarang kelulut. Lapisan getah atau lilin yang lengket dapat ditemukan pada pintu masuk sarang yang berukuran pendek, seperti yang dimiliki spesies H. fimbriata dengan tipe bentuk rongga mulut elips, P. pendleburyi, dan T. melanocephala. Resin, serumen, atau lilin pada pintu masuk sarang kelulut memiliki karakter berbau tak sedap dan tak menarik bagi semut yang dapat mengganggu koloni kelulut(Wille, 1983); (Alves et al., 2018).

Ciri unik permukaan corong yang hanya dimiliki spesies T. collina adalah adanya pori-pori (pores) pada badan corong. Keberadaan pori pada badan corong digunakan sebagai pengatur suhu dan sirkulasi udara bagi koloni kelulut. Karakter permukaan yang berpori juga ditemukan pada spesies Tetragonisca angustula (Latreille) dari Republik Panama (Roubik, 2020).

Paparan sinar matahari berkorelasi dengan variasi bentuk rongga pintu masuk sarang kelulut. Semakin luas bukaan rongga pintu masuk maka semakin banyak energi yang bisa masuk ke dalam sarang koloni kelulut. Sinar matahari juga membantu dalam mempertahankan viskositas kekentalan atau kelengketan getah yang melapisi badan corong pintu masuk ataupun pada sekitar margin pintu masuk. Hal tersebut sangat mendukung proteksi koloni kelulut (Izfa & Imran, 2019). Paparan sinar matahari juga mempengaruhi perilaku kelulut sebab kelulut merupakan serangga diurnal. Kelulut hanya aktif mencari makan atau beraktifitas lainnya ketika pagi hingga sore sehingga perilaku harian tersebut berhubungan dengan dibangunnya pintu masuk terhadap paparan sinar matahari (Michener, 2000). Hal ini sesuai dengan hasil biplot PCA yang menunjukkan bahwa paparan sinar matahari sangat mempengaruhi dibangunnya pintu masuk sarang kelulut pada suatu titik.

Berdasarkan hasil penelitian, H. fimbriata, T. collina, dan T. melanocephala memiliki ciri khas dua bentuk bukaan rongga pintu masuk, yaitu lingkaran dan elips. Hanya spesies T. collina yang memiliki pori-pori yang tampak di badan corong pintu masuk. T. melina merupakan spesies dengan corong terpanjang. P. pendleburyi memiliki margin rongga pintu masuk seperti jaring berwarna putih dan badan corong yang dilapisi getah lengket. T. apicalis menjadi satu-satunya spesies yang membangun pintu masuk dan sarang tertinggi dibandingkan dengan spesies lainnya. Hasil PCA belum dapat membuktikan karakter spesifik penciri suatu spesies kelulut di Kawasan Konservasi Resort Belaban sehingga hanya dapat dijadikan sebagai perkiraan sementara saja untuk mengidentifikasi suatu spesies.